• εργαστήριο-217043_1280

Βασικά σημεία του υγρού στελέχους καλλιέργειας ανακίνησης κυττάρων

Το υγρό στέλεχος είναι ένα στέλεχος που καλλιεργείται με υγρό μέσο καλλιέργειας.Έχει τα πλεονεκτήματα του σύντομου κύκλου παραγωγής στελέχους, της σταθερής βακτηριακής ηλικίας, του βολικού εμβολιασμού, του κατάλληλου για εργοστασιακή παραγωγή και ούτω καθεξής.Χαιρετίστηκε από την πλειοψηφία των καλλιεργητών.Αναδευτήρας κυττάρων (https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/) είναι ένα είδος αναλώσιμου υλικού που απαιτείται για την καλλιέργεια υγρών στελεχών.Τα ακόλουθα σημεία πρέπει να ληφθούν υπόψη στον πολιτισμό:

1.Παρασκευή του μέσου καλλιέργειας σύμφωνα με τον τύπο των διαφόρων συστατικών, στο δοχείο, διαλύεται με νερό, χωρίζεται σε τριγωνικά μπουκάλια, γενικά 250 ~ 300mL φιάλη ανακίνησης κυττάρων 50mL μέσο καλλιέργειας,Τριγωνικό μπουκάλι 500 ml  (https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/)100 mL μέσο καλλιέργειας, βύσμα βαμβακιού, με τυλιγμένη εφημερίδα.Μπορεί επίσης να κατασκευαστεί από 8 στρώσεις γάζας 8cm×8cm σφράγιση πώματος φιάλης, εξωτερικά με καφέ χάρτινη σφράγιση.
2. Η μέθοδος αποστείρωσης σε αυτόκλειστο υιοθετείται γενικά για την αποστείρωση, η οποία απαιτεί 121℃ και 30 λεπτά.Το βγάζουμε και το κρυώνουμε στους 30℃ περίπου.Τοποθετήστε το στο αποστειρωμένο δωμάτιο ή στο κουτί εμβολιασμού για χρήση.
3. Σύμφωνα με τις απαιτήσεις ασηπτικής λειτουργίας, κάθε μπουκάλι μπορεί να συνδεθεί με μια λοξή τάση 2 ~ 3 cm2 και κάθε κεκλιμένο στέλεχος μπορεί να συνδεθεί με 4 ~ 5 φιάλες.Είναι καλύτερα να φέρετε λίγο μέσο με τις προστιθέμενες στραγγίσεις, ώστε να μπορούν να επιπλέουν στην επιφάνεια του μέσου.Μετά τον ενοφθαλμισμό, καλύψτε το στόμιο του μπουκαλιού με τη γάζα που είχε αρχικά βουλώσει και δέστε το καλά με κορδόνι.
4. Το ενοφθαλμισμένο μπουκάλι στελέχους μπορεί να τοποθετηθεί σε κλίνη ανακίνησης για καλλιέργεια ή μπορεί να τοποθετηθεί σε σταθερή θερμοκρασία 24 ~ 26 ℃ για 48 ώρες και στη συνέχεια μπορεί να πραγματοποιηθεί ταλαντευόμενη καλλιέργεια αφού το αερογόνο μυκήλιο επεκταθεί στο μέσο καλλιέργειας .Η συχνότητα ταλάντωσης του παλινδρομικού αναδευτήρα είναι 80 ~ 120 r/min και του περιστροφικού αναδευτήρα είναι 150 ~ 220 r/min.3 ~ 4d μπορούν να καλλιεργηθούν στον αναδευτήρα.Στο τέλος της καλλιέργειας, λόγω διαφορετικών στελεχών, το μέσο καλλιέργειας εμφανίστηκε διαφορετικά χρώματα, όπως το μανιτάρι στρειδιού, το μέσο καλλιέργειας μανιταριών enoki ήταν ανοιχτό κίτρινο.Μανιτάρι, το μέσο καλλιέργειας ericius erinaceus ήταν κοκκινωπό καφέ και άρωμα μανιταριού.Το μέσο καλλιέργειας του μύκητα είναι καφέ, παχύρρευστο και γλυκό.Το μέσο καλλιέργειας μπορεί να χρησιμοποιηθεί για παραγωγή ή περαιτέρω καλλιέργεια επέκτασης μόνο όταν το ξηρό βάρος του μυκηλίου φτάσει τα 10 g/L και η διάμετρος των σφαιριδίων μυκηλίου είναι 1 ~ 2 mm.
 
pl15. Παραγωγή δευτερεύοντος υγρού στελέχους δευτερεύον υγρού στελέχους παραγωγής μέσου καλλιέργειας του ίδιου επιπέδου υγρού στελέχους, το δοχείο καλλιέργειας πρέπει να είναι μεγαλύτερο, η χωρητικότητα δεν είναι μεγαλύτερη από 3500 mL.Μετά την αποστείρωση και την ψύξη, τα ζυμωμένα πρωτεύοντα υγρά στελέχη εισήχθησαν μέσαΑναδευτήρας κυττάρων 5L(https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/)σε αναλογία 5%-10% και καλλιεργείται σε σέικερ με χαμηλή ταχύτητα.Μετά από ορισμένο χρόνο ταλαντευόμενης καλλιέργειας, μπορούν να ληφθούν τα υγρά στελέχη με ομοιόμορφη κατανομή μικροσφαιρών και διαυγές υγρό ζύμωσης.
Συνοπτικά, όταν χρησιμοποιείτε αναδευτήρα κυττάρων για καλλιέργεια υγρών στελεχών, λειτουργήστε σύμφωνα με τις παραπάνω μεθόδους και δώστε προσοχή στον έλεγχο της θερμοκρασίας, της συχνότητας ανακίνησης και άλλων παραγόντων στη διαδικασία για να εξασφαλίσετε το αποτέλεσμα της καλλιέργειας.
επικοινωνήστε με το Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Ώρα δημοσίευσης: Μαρ-21-2023