• εργαστήριο-217043_1280

Πώς να καθαρίσετε τη μόλυνση στο εργοστάσιο κυψελών

Μόλις τα κύτταρα καλλιεργούμε

εργοστάσιο κυττάρωνείναι μολυσμένα, τα περισσότερα από αυτά είναι δύσκολο να τα χειριστούν.Εάν τα μολυσμένα κύτταρα είναι πολύτιμα και είναι δύσκολο να τα αποκτήσετε ξανά, μπορούν να χρησιμοποιηθούν οι ακόλουθες μέθοδοι για την αφαίρεσή τους.

1. Χρησιμοποιήστε αντιβιοτικά

Τα αντιβιοτικά είναι πιο αποτελεσματικά στο να σκοτώνουν τα βακτήριαεργοστάσια κυττάρων.Η συνδυασμένη φαρμακευτική αγωγή είναι πιο αποτελεσματική από τη μόνη φαρμακευτική αγωγή.Η προληπτική φαρμακευτική αγωγή είναι πιο αποτελεσματική από τη φαρμακευτική αγωγή μετά τη μόλυνση.Η προληπτική φαρμακευτική αγωγή γενικά χρησιμοποιεί ένα διπλό αντιβιοτικό (πενικιλλίνη 100u/mL συν στρεπτομυκίνη 100μg/mL).Μετά τη μόλυνση, η μέθοδος καθαρισμού πρέπει να είναι 5 έως 10 φορές μεγαλύτερη από τη συνηθισμένη ποσότητα.Το φάρμακο πρέπει να χρησιμοποιείται για 24 έως 48 ώρες μετά την προσθήκη, και στη συνέχεια να αντικαθίσταται με τη συνήθη ρουτίνα.Υγρό καλλιέργειας.Αυτή η μέθοδος μπορεί να είναι αποτελεσματική στα αρχικά στάδια μόλυνσης.Εκτός από την πενικιλλίνη και τη στρεπτομυκίνη, τα αντιβιοτικά που χρησιμοποιούνται μπορούν επίσης να περιλαμβάνουν γενταμυκίνη, καναμυκίνη, πολυμυξίνη, τετρακυκλίνη, νυστατίνη κ.λπ. Συνήθως χρησιμοποιούνται 400 έως 800 μg/mL καναμυκίνη ή 200 μg/mL τετρακυκλίνη.Το μέσο αλλάζει κάθε 2 έως 3 ημέρες και μεταφέρεται για 1 έως 2 γενιές για θεραπεία.Τα τελευταία χρόνια, έχει αναφερθεί ότι τα αντιβιοτικά 4-φθορο, 2-υδροξυκινολίνη (Ciprofloxacin, Cip), παράγωγο Pleu-romutilin (παράγωγο Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 και παράγωγο τετρακυκλίνης (BM-2)) είναι αποτελεσματικό στη θανάτωση του μυκοπλάσματος όταν χρησιμοποιείται μόνο του ή σε συνδυασμό.Αυτά τα τρία αντιβιοτικά παρασκευάζονται όλα σε συμπυκνωμένα διαλύματα 250Χ σε PBS και αποθηκεύονται στους -20°C για μελλοντική χρήση.Η συγκέντρωση χρήσης Cip είναι 10 μg/mL, το BM-1 είναι 10 μg/mL και το BM-2 είναι 5 μg/mL.Όταν χρησιμοποιείτε, αναρροφήστε πρώτα το μολυσμένο μέσο καλλιέργειας, προσθέστε το μέσο καλλιέργειας RPMI1640 που περιέχει BM-1, στη συνέχεια αναρροφήστε το μέσο καλλιέργειας μετά από 3 ημέρες, προσθέστε το μέσο καλλιέργειας RPMI1640 που περιέχει BM-2 και καλλιέργεια για 4 ημέρες και ούτω καθεξής για 3 συνεχόμενες ημέρες .γύρους, μέχρι να αποδειχθεί με μικροσκόπιο χρώσης φθορισμού 33258 ότι το μυκόπλασμα έχει εξαλειφθεί, τότε προστίθεται κανονικό μέσο καλλιέργειας για καλλιέργεια και διέλευση 3-4 φορές.

Πώς να καθαρίσετε τη μόλυνση στο εργοστάσιο κυψελών1

2. Θερμική επεξεργασία

Η επώαση μολυσμένης ιστοκαλλιέργειας στους 41°C για 18 ώρες μπορεί να σκοτώσει το μυκόπλασμα, αλλά έχει δυσμενείς επιπτώσεις στα κύτταρα.Επομένως, πριν από τη θεραπεία θα πρέπει να διεξαχθεί μια προκαταρκτική δοκιμή για να διερευνηθεί ο χρόνος θέρμανσης που μπορεί να σκοτώσει το μυκόπλασμα στο μέγιστο βαθμό και να έχει τη μικρότερη επίδραση στα κύτταρα.Αυτή η μέθοδος είναι μερικές φορές αναξιόπιστη.Εάν αντιμετωπιστεί πρώτα με φάρμακα και μετά θερμανθεί στους 41°C, το αποτέλεσμα θα είναι καλύτερο.

3. Χρησιμοποιήστε ορό ειδικό για το μυκόπλασμα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα μπορεί να αφαιρεθεί με 5% ανοσοποιητικό ορό από μυκόπλασμα κουνελιού (τίτλος αιμοσυγκόλλησης 1:320 ή παραπάνω).Επειδή το συγκεκριμένο αντίσωμα μπορεί να αναστείλει την ανάπτυξη του μυκοπλάσματος, γίνεται αρνητικό 11 ημέρες μετά τη θεραπεία με αντιορό και παραμένει αρνητικό 5 μήνες αργότερα.είναι αρνητικό.Ωστόσο, αυτή η μέθοδος είναι πιο ενοχλητική και όχι τόσο βολική και οικονομική όσο η χρήση αντιβιοτικών.

4. Άλλες μέθοδοι

Εκτός από τις προαναφερθείσες μεθόδους αφαίρεσης μόλυνσης, υπάρχουν επίσης μέθοδοι εμβολιασμού και στείρωσης σε ζώα, μέθοδοι φαγοκυττάρωσης μακροφάγων, μέθοδοι προσθήκης βρωμουρακίλης σε μολυσμέναμπουκάλια καλλιέργειαςκαι στη συνέχεια ακτινοβολώντας τα με φως, και μεθόδους φιλτραρίσματος κ.λπ., αλλά όλα είναι πιο ενοχλητικά και αναποτελεσματικά.Επομένως, από τη στιγμή που εμφανιστεί μόλυνση από μυκόπλασμα, εκτός εάν έχει ιδιαίτερη σημασία, γενικά απορρίπτεται και επανακαλλιεργείται.

επικοινωνήστε με το Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Ώρα δημοσίευσης: Οκτ-24-2023