• εργαστήριο-217043_1280

Μέθοδος αφαίρεσης κυτταρικών υπολειμμάτων

Υπάρχουν πολλά κυτταρικά θραύσματα μετά από μηχανική λύση του κυτταρικού εναιωρήματος.Πώς να αφαιρέσετε αυτά τα θραύσματα;Ας ρίξουμε μια ματιά στις διάφορες προσεγγίσεις:

1. Χρησιμοποιήστε τη μέθοδο αραίωσης.Όταν τα κύτταρα αραιωθούν, μπορούν επίσης να πολλαπλασιαστούν, θα γίνονται όλο και πιο πολλά και τα υπολείμματα των κυττάρων θα γίνονται αντίστοιχα όλο και λιγότερα.
2. Υπάρχει και φυσικός οικισμός.Τα κελιά εγκαθίστανται γρηγορότερα από τα περισσότερα θραύσματα: : Μετακινήστε το αιώρημα κελιών στοσωλήνας φυγοκέντρησηςκαι όταν τα περισσότερα κύτταρα βυθίζονται, το άνω διάλυμα μπορεί να αναρροφηθεί και στη συνέχεια να προστεθεί στο διάλυμα καλλιέργειας για να αιωρηθούν τα κύτταρα.Αυτή η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί επανειλημμένα, ενώ κάθε φορά μπορείτε να παρατηρήσετε στο μικροσκόπιο αν ανταποκρίνεται στις απαιτήσεις σας.
3. Φυγόκεντρος χαμηλής ταχύτηταςμπορεί να αφαιρέσει τα υπολείμματα, γενικά 700g,5mins
4. Κατά τη φυγοκέντρηση, υπό την προϋπόθεση ότι ο αριθμός των κυττάρων είναι επαρκής, μειώστε τον χρόνο φυγοκέντρησης, όπως 5 λεπτά, 1000 rpm, αντί για 3 λεπτά, 1000 rpm, και αφαιρέστε το υπερκείμενο, επειδή η νέκρωση και τα υπολείμματα είναι γενικά στο υπερκείμενο!Αυτή η επέμβαση χρειάζεται να γίνει μόνο μία φορά κατά τη διαδικασία πλύσης πριν από την επώαση!

Αν και υπάρχουν πολλοί τρόποι για να αφαιρέσετε τα κυτταρικά υπολείμματα, θα διαπιστώσετε ότι η φυγοκέντρηση είναι μια από τις πιο αποτελεσματικές μεθόδους!

450

Και επειδή οι φυτικοί ιστοί και τα κύτταρα έχουν κυτταρικά τοιχώματα που αποτελούνται από κυτταρίνη, ημικυτταρίνη και πηκτίνη, είναι γενικά απαραίτητο να αλέσετε χαλαζιακή άμμο ή σκόνη γυαλιού με κατάλληλο διάλυμα εκχύλισης ή να επεξεργαστείτε με κυτταρίνη για να επιτευχθεί ο σκοπός.Ο κατακερματισμός των βακτηριακών κυττάρων είναι πιο δύσκολος, επειδή ολόκληρος ο σκελετός του βακτηριακού κυτταρικού τοιχώματος είναι στην πραγματικότητα ένας ομοιοπολικός δεσμός κυστικών μακρομορίων πεπτιδογλυκάνης, πολύ σκληρός.Οι συνήθεις μέθοδοι θραύσης των βακτηριακών κυτταρικών τοιχωμάτων περιλαμβάνουν σύνθλιψη με υπερήχους, λείανση με άμμο, εξώθηση υψηλής πίεσης ή επεξεργασία με λυσοζύμη.Αφού σπάσουν ο ιστός και τα κύτταρα, επιλέγεται το κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα για την εκχύλιση της επιθυμητής πρωτεΐνης.Τα αδιάλυτα υλικά όπως τα κυτταρικά θραύσματα αφαιρούνται μεφυγόκεντροςή διήθηση.

επικοινωνήστε με το Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Ώρα δημοσίευσης: 24 Ιουλίου 2023